医学生物化学与分子生物学实验技术-(第2版)
医学生物化学与分子生物学实验技术-(第2版)作者:王玉明 开 本:32开 书号ISBN:9787302467205 定价: 出版时间:2017-07-01 出版社:清华大学 |
三、血清丙氨酸氨基转移酶活性测定(赖氏法) ...........................40四、血糖的定量测定(葡萄糖氧化酶法) ................................42五、激素对血糖浓度变化的影响 .....43六、血浆高密度脂蛋白 -胆固醇的测定 .........................................45七、紫外分光光度法检测核酸的浓度及纯度 .............................46
第 4章 将混合物中各种组分分开——层析技术 .................................... 48第 1节 层析技术概述 ............................ 48一、层析技术的形成和发展 .............48二、层析技术的基本原理 .................49三、层析技术的分类 .........................49四、层析技术的基本要求 .................50第 2节 吸附层析 .................................... 50一、吸附层析的原理 .........................50二、吸附层析的操作 .........................50第 3节 分配层析 .................................... 52一、纸层析的原理 .............................52二、纸层析的操作 .............................52第 4节 凝胶过滤层析 ............................ 54一、凝胶过滤层析的原理 .................54二、凝胶过滤层析的特征常数 .........54三、凝胶过滤层析的常用介质 .........55四、凝胶过滤层析的操作 .................56五、凝胶过滤层析的应用 .................57第 5节 离子交换层析 ............................ 57一、离子交换层析的原理 .................57二、离子交换剂 .................................58三、离子交换层析的操作 .................59四、离子交换层析的应用 .................61第 6节 亲和层析 .................................... 61一、亲和层析的原理 .........................61二、亲和层析的操作 .........................62第 7节 实验练习 .................................... 63一、氨基酸的分离鉴定——纸层析法 .............................................63
二、转氨酶的活性鉴定——薄层层析法 .............................................64三、核苷酸的分离——离子交换柱层析法 .........................................65四、胰蛋白酶的分离纯化——亲和层析法 .........................................67五、血清蛋白质的层析分离——分子筛层析法 .............................68
第 5章 分离带电颗粒的有效手段——电泳技术 .................................... 69第 1节 电泳技术概述 ............................ 69一、电泳技术的形成和发展 .............69二、电泳技术的基本原理 .................70第 2节 影响电泳的因素 ........................ 71一、溶液的 pH...................................71二、缓冲液的离子强度 .....................71三、电场强度 .....................................72四、电渗作用 .....................................72第 3节 常用电泳技术 ............................ 72
一、纸电泳和醋酸纤维素薄膜电泳 .............................................72二、凝胶电泳 .....................................73三、等电聚焦电泳 .............................75四、双向电泳 .....................................76五、核酸电泳 .....................................77六、印迹转移电泳 .............................79第 4节 实验练习 .................................... 79
一、血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 .............................................79二、血清乳酸脱氢酶同工酶琼脂糖凝胶电泳 .................................81三、血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 ...........................................82四、 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量 .........83五、 DNA琼脂糖凝胶电泳 ...............86六、限制性内切酶对质粒 DNA酶切产物的电泳鉴定 .................87 VII …………目 录
第 6章 利用离心场沉降大分子——离心技术 .................................... 90第 1节离心技术的基本原理 ................ 90一、颗粒沉降的原理 .........................90二、沉降系数 .....................................91三、相对离心力 .................................91第 2节 离心机的类型及操作规程 ........ 91一、离心机的类型 .............................91二、制备型离心机 .............................92三、分析型离心机 .............................94四、离心操作的注意事项 .................94第 3节 制备型超速离心的分离方法 .... 95一、差速沉降离心法 .........................95二、密度梯度区带离心法 .................95三、等密度梯度区带离心法 .............96第 4节 实验练习 .................................... 96一、肝糖原的提取和鉴定 .................96二、酪蛋白的制备 .............................97三、动物肝脏 DNA的提取 ..............98四、酵母 RNA的提取及成分鉴定 ...........................................100五、质粒 DNA的提取与鉴定 ........101六、感受态细菌的制备及质粒 DNA的转化 .............................104七、蔗糖密度梯度离心分离病毒 ...........................................106
第 7章 利用碱基互补探查核酸序列——分子杂交技术 ............ 109第 1节 核酸分子杂交的基本原理 ...... 109一、变性与复性 ...............................109二、建立在 DNA变性与复性基础上的核酸杂交技术 ...................110第 2节 核酸分子杂交的主要类型及程序 ...........................................111一、固相杂交的支持物 ...................111二、常用的转移方法 .......................112三、固相杂交的基本程序 ...............112四、固相杂交的主要类型 ...............113第 3节 核酸探针的分类和标记 .......... 114一、核酸探针的分类 .......................114二、核酸探针的标记 .......................115第 4节 实验练习 .................................. 117一、 Southern杂交 ...........................117二、 Northern杂交 ...........................118三、组织原位杂交 ...........................120四、斑点杂交 ...................................121
教材 研究生/本科/专科教材 工学
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