基因工程 内容简介

本书共十章，重点阐述基因工程概论、基因工程条件、基因工程的主要技术、目的基因的获得、重组子构建及其转化，外源基因表达的分子机制及提高其表达的技术策略、外源基因表达产物的分离和纯化、植物、动物和微生物基因工程的技术流程与应用和基因工程的安全性评价与管理等内容。本书坚持基础性、通用性和教学实用性相结合，在重点阐述基本理论、原理和方法的同时，尽可能反映基因工程领域的一些新进展。
本书的基础性和实用性强，突出了农林院校生物学专业偏向应用的特点，适合用作全国农林院校生物学及生物工程等相关专业本科教材。

基因工程 目录

前言
**章 绪论
**节 基因工程的内容与应用
一、基因工程的概念
二、基因工程的技术流程
三、基因工程的基本条件
四、基因工程的技术策略
五、基因工程的作用与影响
第二节 基因工程的发展历程和理论基础
一、基因工程的发展历程
二、基因工程理论基础和技术支撑
第三节 学习基因工程课程的意义和方法
一、学习和研究基因工程的意义
二、学习基因工程的方法
思考题
第二章 基因工程的酶学基础
**节 限制性内切核酸酶
一、限制-修饰系统
二、限制性内切核酸酶的类型
三、限制性内切核酸酶的命名
四、Ⅱ型限制内切核酸酶的基本特性
五、影响限制性内切核酸酶活性的因素
六、限制性内切核酸酶对DNA的消化作用
第二节 DNA连接酶
一、DNA连接酶的发现
二、DNA连接酶的特点
三、DNA连接酶的作用机理
四、影响连接反应的因素
第三节 DNA聚合酶和反转录酶
一、DNA聚合酶
二、反转录酶
第四节 DNA修饰酶
一、末端脱氧核苷酸转移酶
二、T4多核苷酸激酶
三、碱性磷酸酶
第五节 外切核酸酶
一、大肠杆菌外切核酸酶Ⅶ
二、双链外切核酸酶
第六节 单链内切核酸酶
一、S1核酸酶
二、Bal 31核酸酶
三、脱氧核糖核酸酶工
第七节 RNA酶
一、核糖核酸酶A
二、核糖核酸酶H
三、核糖核酸酶T1
思考题
第三章 载体
**节 克隆载体
一、质粒载体
二、噬菌体载体
三、噬菌体-质粒杂合载体
四、人工染色体及其应用
第二节 表达载体
一、质粒表达载体
二、病毒表达载体
三、大片段表达载体
第三节 特殊用途的载体
一、插入或定点整合突变载体
二、启动子探针型表达载体
三、RNAi载体
思考题
第四章 基因工程的主要技术及其原理
**节 DNA和RNA的提取和纯化
一、DNA提取的基本原理与方法
二、RNA提取的基本原理与方法
三、DNA或RNA浓度、纯度和相对分子质量的测定
第二节 凝胶电泳
一、琼脂糖凝胶电泳
二、琼脂糖变性胶电泳
三、聚丙烯酰胺凝胶电泳
四、脉冲电场凝胶电泳
五、凝胶电泳中DNA的检测
第三节 核酸和蛋白质的分子杂交
一、探针的标记
二、Southern杂交
三、Northem杂交
四、菌落(或噬菌斑)杂交
五、斑点印迹杂交和狭线印迹杂交
六、Western杂交
七、液相杂交
第四节 聚合酶链式反应技术
一、PCR技术原理
二、PCR反应体系
三、PCR技术的应用
第五节 DNA序列分析
一、Maxam-Gilbert化学降解法
二、Sanger双脱氧链终止法
三、DNA的自动测序
四、DNA的测序策略
五、核苷酸序列的生物信息学分析
第六节 基因定点诱变
一、盒式诱变
二、寡核苷酸引物诱变
三、PCR诱变
第七节 DNA与蛋白质互作分析
一、酵母单杂交系统
二、凝胶阻滞试验
三、DNase Ⅰ工足迹试验
四、DNA与蛋白质互作的免疫沉淀分析
思考题
第五章 目的基因的获得
**节 PCR扩增获得目的基因或cDNA
一、已知序列基因的PCR扩增
二、常规PCR衍生的几种基因克隆技术
第二节 基因组文库的构建与基因分离
一、基因组文库的类型
二、构建基因组文库应满足的条件
三、基因组文库的构建
四、其他载体基因组文库的构建
五、基因组文库的扩增筛选
第三节 cDNA文库的构建与筛选
一、cDNA文库的特征及发展
二、构建cDNA文库应满足的条件
三、cDNA文库的构建
四、cDNA文库的筛选
第四节 根据基因差异表达获得目的基因
一、差异显示PCR
二、cDNA代表性差异分析
三、抑制性削减杂交
四、RNA任意引物PCR
第五节 基因的化学合成
一、寡聚核苷酸单链的化学合成
二、探针的化学合成
三、连接子和接头的合成
四、基因的半合成(酶促合成)
五、全长基因化学合成
思考题
第六章 DNA重组的操作
**节 DNA的体外重组
一、黏性末端的连接
二、平末端的连接
三、PCR产物的连接
四、Gateway载体构建系统
第二节 重组体导入受体细胞的原理与技术

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