4.2 实验方法 69

4.3 土壤的理化指标 69

4.4 细菌的富集与筛选 70

4.4.1 实验方法 70

4.4.2 结果与分析 70

4.5 各菌株形态及革兰氏染色 71

4.5.1 鉴定方法 71

4.5.2 结果与分析 71

4.6 各菌株性能的测定 73

4.6.1 实验方法 73

4.6.2 结果与分析 73

4.7 菌株的16S rDNA 序列测定 77

4.8 氮循环微生物菌剂的制备 78

4.9 菌剂活性的测定 78

4.9.1 菌剂活性的测定方法 78

4.9.2 结果与分析 79

4.10 菌剂降解能力的测定 83

4.10.1 菌剂降解能力的测定方法 83

4.10.2 结果与分析 84

4.11 土培实验验证菌株效果 95

4.11.1 总氮浓度随时间的变化情况 95

4.11.2 氨氮浓度随时间的变化情况 97

4.11.3 硝态氮浓度随时间的变化情况 99

4.11.4 亚硝态氮浓度随时间的变化情况 101

4.11.5 PLFA 随时间的变化情况 103

4.12 本章小结 105

第5章氮在土壤中的迁移和转化107

5.1 概述 107

5.1.1 氨化作用与氨化微生物 107

5.1.2 硝化作用与硝化微生物 108

5.1.3 反硝化作用与反硝化微生物 109

5.2 总氮在土壤中的迁移转化 110

5.2.1 总氮在潮土中的变化趋势 110

5.2.2 总氮在褐土中的变化趋势 118

5.3 硝态氮在土壤中的变化趋势 123

5.3.1 硝态氮在潮土中的迁移转化 123

5.3.2 硝态氮在褐土中的迁移转化 130

5.4 氨氮在土壤中的迁移转化 135

5.4.1 氨氮在潮土中的迁移转化 135

5.4.2 氨氮在褐土中的迁移转化 141

5.5 亚硝态氮在土壤中的迁移转化 146

5.5.1 亚硝态氮在潮土中的迁移转化 146

5.5.2 亚硝态氮在褐土中的迁移转化 148

5.6 本章小结 153

第6章基于高通量测序技术下土壤微生物种类与多样性分析154

6.1 高通量测序技术原理及方法 154

6.1.1 土壤的提取和纯化方法 154

6.1.2 PCR 扩增 154

6.1.3 PCR 产物的混样和纯化 155

6.1.4 文库构建和上机测序 155

6.1.5 数据计算方法 155

6.2 土壤细菌种类及多样性分析 155

6.2.1 土壤细菌高通量测序分类总结 156

6.2.2 土壤细菌物种相对丰度统计 157

6.2.3 土壤细菌Alpha 多样性指数分析 159

6.2.4 稀释曲线分析 161

6.2.5 土壤氮循环功能细菌统计 161

6.3 土壤古菌种类及多样性分析 162

6.3.1 土壤古菌OTU 聚类分析和物种注释 163

6.3.2 土壤古菌物种相对丰度统计 163

6.3.3 土壤古菌Alpha 多样性指数分析 164

6.3.4 土壤氮循环功能古菌统计 165

6.3.5 稀释曲线分析 165

6.4 土壤真菌种类及多样性分析 165

6.4.1 土壤真菌OTU 聚类分析 166

6.4.2 土壤真菌相对丰度统计 166

6.4.3 土壤真菌Alpha 多样性分析 166

6.4.4 样品稀释曲线分析 168

6.5 本章小结 168

第7章结论与建议170

7.1 主要成果与认识 170

7.2 河北平原包气带和浅层地下水氮污染控制对策 174

附录 176

附录1 7种菌株的测序序列 176

附录2 实验相关照片 183

参考文献 185

氮氧同位素表示踪河北平原包气带和地下水氮的来源与迁移化机理 作者简介

高太忠，河北科技大学环境科学与工程学院，教育部学位与研究生教育评估和咨询专家、河北省科技奖励评审专家、国家自然科学基金工程与材料科学学部通信评议专家，教授，硕士生导师，长期从事环境化学和水土污染与控制技术研究。主持或承担的20余项科研项目，其中主持和参加国家自然科学基金面上项目各一项(No.41373096, 48970175)、主持和参加省部级、国家重点开放实验室基金等项目20项；公开发表论文85篇，其中被SCI、EI收录12篇。

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