实用神经变性疾病生物学实验方法与技术

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实用神经变性疾病生物学实验方法与技术

实用神经变性疾病生物学实验方法与技术

作者:潘晓东

开 本:32开

书号ISBN:9787122276018

定价:198.0

出版时间:2016-09-01

出版社:化学工业出版社

实用神经变性疾病生物学实验方法与技术 本书特色

实验前该准备哪些试剂?怎么配制实验试剂?实验前该准备哪些仪器?怎么培养海马神经元?怎么观察神经元的形态学?怎么鉴定神经元?怎么培养小鼠中脑多巴胺能神经元?怎么培养神经干细胞?怎么培养原代神经胶质细胞?怎么测定小胶质细胞趋化、迁移、吞噬功能?怎么测试实验动物的学习和记忆?怎么检测基因芯片?怎么做神经免疫组织化学和免疫荧光染色?怎么应用image j 神经生物分析软件、graphpad prism 6.0软件、spss软件?……本书图文结合予一一介绍。实验流程严格按照美国国立卫生研究院(nih)、国立老化研究所(nia)的标准、规范执行。内容实用,具有可操作性。本书适合从事神经病学研究的人员,如神经内科、神经外科医师、研究生、医学院校基础研究人员,特别适合初学者阅读参考。

实用神经变性疾病生物学实验方法与技术 内容简介

实验流程严格按照美国国立卫生研究院(nih)、国立老化研究所(nia)的标准、规范执行包括实验技术的概述,材料准备、操作步骤、操作指导、思考、注意事项(包括实验结果不是想要的时的应急预案)、失败的经验或成功的经验总结等图文结合介绍image j 神经生物分析软件、graphpad prism 6.0软件、spss软件的应用按本书的指导,可以提高实验效率,分析统计实验结果。 

实用神经变性疾病生物学实验方法与技术 目录

**章 原代神经细胞培养和细胞功能测定 / 1**节 原代皮质和海马神经元培养 1第二节 新生小鼠中脑多巴胺能神经元培养 3一、单层皮质星形胶质细胞表面培养新生鼠中脑多巴胺能神经元 3二、单层星形胶质细胞表面培养新生鼠中脑多巴胺能神经元及形成  神经突触 9三、本节实验中使用到的试剂和溶液 11四、注意事项 13五、常见问题及解决方案 13六、预期结果 13七、时间因素 14第三节 小鼠神经干细胞培养 14一、成年鼠神经干细胞培养 14二、新生鼠海马神经干细胞的培养 19三、胎鼠神经干细胞的培养 20第四节 原代神经胶质细胞培养 21一、星形胶质细胞的分离和培养 21二、新生鼠小胶质细胞的原代培养 23三、成年鼠小胶质细胞的分离和培养 25第五节 小胶质细胞功能实验 29一、趋化和迁移实验 29二、体外测定小胶质细胞吞噬功能(吞噬尼罗红微球/a突触核蛋白/ab) 30第二章 模式动物行为学实验 / 34**节 morris水迷宫 34第二节 y-迷宫 36第三节 小鼠平衡功能实验 39第四节 抑郁模型的建立和评定 40一、抑郁症的模型制作 41二、抑郁动物的行为学评价 45第五节 嗅觉行为功能测定 47一、埋藏食物小球实验 48二、嗅觉迷宫 48第六节 大脑中动脉闭塞模型的建立和评定 49第七节 运动功能评定 52一、小鼠肢体力量测试实验——小鼠抓力测试 52二、小鼠耐力测试实验——跑台实验 53第八节 感觉(痛触觉)系统评估 54一、von frey test 54二、智能热板仪 56三、甩尾实验 57第三章 神经病理学实验 / 59**节 脑组织的取材、保存和标本制作 59第二节 脊髓组织的取材、保存和标本制作 62一、脊髓的取材和保存 62二、 脊髓冰冻切片的制作 64第三节 小鼠脑脊液采集 66第四节 海马脑片场电位的神经电生理记录方法 67第五节 神经免疫组织化学和免疫荧光染色 71第六节 透视电镜标本制作 74第七节 老化组织相关病理特殊染色(sa-b-gal 、银染色) 77一、神经原纤维缠结(nfts)染色 77二、b-淀粉样蛋白染色 80三、衰老相关b-半乳糖苷酶染色 82第八节  神经组织高尔基染色 83第九节 神经组织体视学分析技术 86第十节 共聚焦扫描及定量技术 92一、激光共聚焦显微镜的成像原理 92二、激光共聚焦显微镜在神经变性疾病研究中的运用 93三、激光共聚焦显微镜结构 95四、基本扫描及图像获取 95五、微分干涉差(dic)扫描及图像获取 102六、拼图扫描及图像获取 103七、z-stack扫描及图像获取 103八、时间序列扫描 105九、激光共聚焦图像定量及后处理 106第四章 神经生化和基因检测 / 115**节 转基因动物的基因型鉴定、保种和管理 115一、小鼠生殖生理 115二、小鼠的生长周期 116三、基因工程鼠饲养繁殖一般流程和注意事项 116四、常用小鼠品系的概况 117五、几种常用神经变性疾病转基因鼠的介绍和鉴定 118第二节 神经组织蛋白检测 125一、蛋白质印迹法 125二、免疫共沉淀原理及步骤 130三、动物脑组织匀浆检测ab 132第三节 rna提取及实时荧光定量pcr技术 134一、rna提取 134二、rt-pcr 135三、qpcr 135第四节 基因芯片检测 140一、单核苷酸多态性芯片实验 140二、基因表达谱芯片检测 142第五节 荧光素酶报告基因技术分析启动子转录活性 143第六节 荧光定量pcr法检测端粒酶活性 146第七节 中枢神经系统突触和非突触线粒体的分离提取 148第五章 分子影像技术检测神经变性疾病 / 157**节 pet/spect-ct显像探针的制备 158第二节 fmri成像技术的原理及其实验设计与数据处理 164一、fmri实验设计 164二、实验设备 166三、实验数据处理 166四、fmri实验相关的准备 169五、小结 170第六章 神经变性疾病患者临床神经评估、样本保存和数据库建设 / 171**节 神经变性疾病临床登记和数据库建立和实施 171一、临床研究目标的确立 171二、研究方案的确立 172三、组织机构的建立 173四、病例报告表(crf)的建立 174第二节 神经变性疾病患者血液、脑脊液组织样本的保存和处理 177一、血液及血液成分的处理和保存 178二、脑脊液的处理和保存 179三、标本dna的提取和保存 180 附表6-1 标本保存详细记录 180 附表6-2 关于使用组织样本开展科学研究的知情同意书 181第三节  神经心理认知障碍测试诊断系统 182一、医生端系统 182二、用户管理 183三、临床病例登记 183四、案例管理 186五、统计打印 190六、量表管理 191第七章 神经生物学常用分析及作图软件的应用 / 193**节 image j神经生物分析软件的应用 193一、 image j神经生物分析软件的基本功能 193二、 image j神经生物分析软件分析免疫荧光定量技术 197第二节 graphpad prism 6.0作图和统计应用 205一、折线图 205二、直条图 208三、生存曲线图 216四、散点图 219五、饼图 225第三节 logistic回归、cox风险模型以及kaplan-meier曲线的统计应用 231一、logistic回归分析和roc工作曲线的制订 231二、 cox回归分析 238三、kaplan-meier曲线分析 242第四节 endnote×7的应用 245一、文献管理 245二、论文撰写 245

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