基础分子生物学实验指导 本书特色
《基础分子生物学实验指导》全书共分7章,包括基因组DNA操作技术、质粒操作技术、RNA操作技术、PCR技术与应用、电子克隆、蛋白质分离与检测技术和外源基因的表达,总计29个适合生物学及相关专业本科生及研究生初学者学习和使用的分子生物学实验。本书在内容选择上力图体现分子生物学研究方法及技术的核心及现代性。在每章的前面设计了“相关知识”,以方便学生掌握有关技术及相关理论知识。在每个实验操作的后面安排了注意事项和思考题。在附录中提供了一些分子生物学相关网站和分子生物学实验中常用仪器设备,并注明了简要的操作规程和注意事项等。
本书可为高等学校生命科学类专业教学使用,也可供有关专业人员参考选用。
基础分子生物学实验指导 内容简介
《基础分子生物学实验指导/大学生实践教学改革系列教材》共分7章,包括基因组DNA操作技术、质粒操作技术、RNA操作技术、PCR技术与应用、电子克隆、蛋白质分离与检测技术和外源基因的表达,总计29个适合生物学及相关专业本科生及研究生初学者学习和使用的分子生物学实验。《基础分子生物学实验指导/大学生实践教学改革系列教材》在内容选择上力图体现分子生物学研究方法及技术的核心及现代性。在每章的前面设计了“相关知识”,以方便学生掌握有关技术及相关理论知识。在每个实验操作的后面安排了注意事项和思考题。在附录中提供了一些分子生物学相关网站和分子生物学实验中常用仪器设备,并注明了简要的操作规程和注意事项等。 《基础分子生物学实验指导/大学生实践教学改革系列教材》可为高等学校生命科学类专业教学使用,也可供有关专业人员参考选用。
基础分子生物学实验指导 目录
**章 基因组DNA操作技术
**节 基因组DNA的提取
实验一 SDS法提取小麦叶片DNA
实验二 动物组织基因组DNA的提取
实验三 细菌基因组DNA的提取
第二节 DNA质量的检测
实验四 核酸的酶切及电泳
第三节 Southern杂交技术
实验五 小麦基因组DNA的Southern杂交
第二章 质粒操作技术 J7
**节 外源基因插入质粒及转化大肠杆菌
实验一 外源基因与质粒载体的连接
实验二 热击法转化质粒
第二节 质粒的提取及检测
实验三 碱裂解法提取大肠杆菌质粒
实验四 质粒的酶切鉴定
第三章 RNA操作技术
**节 总RNA的提取及分析
实验一 用TRIZOL试剂提取小麦叶片总RNA
实验二 从冰冻血液中提取总RNA
实验三 总RNA的变性凝胶电泳
第二节 Northem杂交技术
实验四 小麦衰老相关蛋白基因的Northern杂交
第三节 cDNA文库构建及筛选
实验五 小麦cDNA文库的构建
第四章 PcR技术与应用
**节 普通PCR
实验一 PCR检测重组质粒中的插入片段
实验二 随机引物扩增多态DNA(RAPD)
附 用16S rDNA方法鉴定细菌种属
第二节 反转录PCR
实验三 反转录PCR扩增小麦в-actin基因
第三节 定时荧光定量PCR
实验四 定时荧光定量PCR测定小麦中Cu/Zn-SOD基因含量
第五章 电子克隆
实验一 基于生物信息学克隆水稻过氧化氢酶基因
第六章 蛋白质分离与检测技术
**节 SDS-PAGE电泳分离蛋白质
实验一 SDS-PAGE电泳检测蛋白质相对分子质量
附 1,5-二磷酸核酮糖羧化酶加氧酶的层析分离与电泳鉴定
第二节 Western杂交技术
实验二 小麦RuBisCO蛋白的Western杂交
第三节 等电聚焦电泳
实验三 小麦过氧化物酶同工酶的等电聚焦分析
第四节 蛋白质双向电泳
实验四 蛋白质双向电泳检测小麦叶片蛋白
第七章 外源基因的表达
**节 外源基因在大肠杆菌中的表达
实验一 绿色荧光蛋白基因表达载体的构建
实验二 绿色荧光蛋白在大肠杆菌中的诱导表达
第二节 外源基因在枯草杆菌中的表达
实验三 枯草杆菌电击转化(高渗透法)
实验四 重组载体pHT43-lip在枯草杆菌中的分泌表达
第三节 外源基因在酵母中的分泌表达
实验五 绿色荧光蛋白重组表达载体pPIC9K-GFP的构建
实验六 绿色荧光蛋白在毕赤酵母中的诱导表达
主要参考文献
附录
附录一 常用试剂及缓冲液
附录二 氨基酸及遗传密码
附录三 常用的相对分子质量标记
附录四 分子生物学有关网络资源
附录五 分子实验常用仪器设备